Comparaison du rendement des écouvillonnages nasopharyngés, des aspérités nasales et des expectorations induites pour la détection de Bordetella pertussis chez les nourrissons hospitalisés

Les tests PCR ont grandement amélioré la détection de la sensibilité et le délai d’attente pour le diagnostic par rapport à la culture. En outre, différents échantillons respiratoires, tels que les écouvillons rhinopharyngés floqués NPSs, les aspirats rhinopharyngés NPAs et l’expectoration induite, ont été utilisés pour la détection de B pertussis, bien qu’il y ait une comparaison tête-à-tête limitée à l’évaluation du rendement de la PCR à partir des méthodes d’échantillonnage MethodsHospitalized nourrissons & lt; des mois d’âge qui répondaient à un large critère syndromique des maladies respiratoires ont été testés pour l’infection à B pertussis par PCR sur des paires de NPS et de NPA; ou NPS appariés et crachats induits Une analyse exploratoire de la culture de B pertussis a été réalisée sur des échantillons d’expectorations induites et dans un sous-ensemble de NPSsResultsDe novembre à mai, des nourrissons avec des NPS appariés et des NPA ont été testés; Des cas de coqueluche confirmés par PCR ont été identifiés, dont positifs pour la PCR sur les deux échantillons, mais positifs pour NPS ou NPA De mars à octobre, les nourrissons ont eu des NPS et des expectorations induites, et des cas de coqueluche ont été identifiés par PCR, y compris % positif sur les deux échantillons,% seulement positif sur NPS, et% seulement positif sur les expectorations induites Les types de spécimens avaient une valeur prédictive négative similaire & gt;% et sensibilité & gt;% Comparé à la PCR, la sensibilité de culture était% dans les expectorations induites et% dans NPSsConclusions Des écouvillonnages naso-pharyngés, des aspirations nasopharyngées et des expectorations induites ont été effectués de manière similaire pour la détection de l’infection à B pertussis chez les nourrissons par PCR

L’infection par Bordetella pertussis touche tous les groupes d’âge, les jeunes enfants étant les plus susceptibles de développer une maladie grave Un diagnostic rapide et précis de la maladie pourrait guider la prise en charge clinique, y compris le contrôle des infections. dans les hôpitaux L’isolement de Bordetella pertussis d’un spécimen respiratoire par culture microbienne est l’étalon-or conventionnel pour confirmer une infection coquelucheuse La culture a toutefois une faible sensibilité parce que l’organisme est exigeant. En outre, la sensibilité de la culture diminue avec la progression de la maladie. le rendement le plus élevé étant pendant la phase catarrhale de la maladie, et il exige – jours pour grandir, isoler et identifier l’organisme La culture fournit néanmoins une opportunité pour la caractérisation phénotypique et génotypique de B pertussis Polymerase réaction en chaîne PCR est de plus en plus utilisée pour le diagnostic de pertus sis, car elle fournit des résultats rapides et est plus sensible que la culture pendant la dernière partie de la maladie et de la thérapie post-antibiotique Une sélection rigoureuse des gènes cibles pour les analyses PCR est nécessaire pour obtenir une bonne spécificité et Prévention et le Centre européen de prévention et de contrôle des maladies recommandent que les prélèvements pour le dépistage de l’infection à B pertussis soient effectués par aspiration ou par écouvillonnage du nasopharynx postérieur Un certain nombre d’études comparent le rendement des NPAs nasopharyngés et des NPSs rhinopharyngés floqués. pour identifier les infections virales ou bactériennes respiratoires par PCR Une sensibilité à l’écouvillon nasopharyngé de & g% comparée aux NPA a été rapportée; L’échantillonnage nasopharyngé postérieur est cependant une condition préalable pour obtenir des taux de détection comparables à ceux des NPA Des expectorations induites ont également été explorées chez les enfants comme spécimen de détection des pathogènes respiratoires chez les patients présentant une infection des voies respiratoires inférieures. maladie Deux études récentes en Afrique du Sud ont montré que chez les enfants & lt; Les auteurs ont comparé le rendement et la sensibilité du NPS recueilli dans le milieu de transport universel UTM à celui du NPA et des expectorations induites pour le transport. la détection de B pertussis par PCR En outre, nous avons exploré la sensibilité de la culture B pertussis lors de l’utilisation de NPA ou d’expectorations induites

Sujets et méthodes

Étude de la population et de la collection d’échantillons

Cette étude a été réalisée dans le cadre d’une surveillance hospitalière visant à déterminer l’étiologie pathogène spécifique des hospitalisations liées au LRTI chez des enfants hospitalisés à l’hôpital universitaire Chris Hani Baragwanath à Soweto, en Afrique du Sud. Ce rapport décrit les infections à B. pertussis détectées en utilisant différentes méthodes d’échantillonnage. nourrissons & lt; Les tuteurs légaux de tous les nourrissons hospitalisés répondant aux critères généraux de la maladie respiratoire, c’est-à-dire tous les signes ou symptômes de la toux quelle que soit la durée, la tachypnée corrigée en fonction de l’âge, les récessions thoraciques, la cyanose Les données démographiques et cliniques détaillées, y compris l’exposition au virus de l’immunodéficience humaine (VIH) in utero, ont été recueillies dans les dossiers hospitaliers et en interrogeant les nourrissons. Les nourrissons inscrits avaient au moins NPS recueillis en utilisant un tampon floqué pour le test PCR Tous les nourrissons inclus dans la présente analyse avaient un NPS recueilli et au moins un autre échantillon respiratoire NPA ou expectoration induite Pendant la première période de l’étude, taux de PCR positifs pour la coqueluche ont été comparés entre les NPS et les NPA; Les NPA ont été recueillies de novembre à mai. Figure De mars à octobre, les expectorations induites ont été recueillies chez les nourrissons âgés de un mois à & lt; mois lorsque cliniquement stable qui ont été admis dans les services pédiatriques généraux et excluant ceux admis dans le service de courte durée échantillons d’expectoration induite ont été testés par PCR et également plaqué sur gélose au gélose Regan-Lowe Agar, Media Mage, Afrique du Sud pour la détection des espèces Bordetella par culture Un NPS supplémentaire a été collecté sur les supports de transport Regan-Lowe auprès des participants. Mois d’âge à partir de mai pour la détection des espèces de Bordetella par culture Figure affiche le nombre des différents types d’échantillons analysés et les dates de l’étude Figure Voir grandDownload slideDiagramme représentant le nombre de nourrissons inscrits et de spécimens analysés pendant la période d’étude Abréviations: NPA, nasopharyngeal asphalt; NPS, écouvillon nasopharyngé; PCR, réaction en chaîne de la polyméraseFigure View largeTélécharger la diapositiveDiagramme représentant le nombre de nourrissons inscrits et de spécimens analysés pendant la période d’étude Abréviations: NPA, aspiration nasopharyngée; NPS, écouvillon nasopharyngé; PCR, amplification en chaîne par polymérase Des écouvillonnages nasopharyngés ont été recueillis à l’aide d’un écouvillon floqué en nylon disponible dans le commerce sur le bout d’une tige en plastique souple FLOQS, Copan Flock Technologies, Brescia, Italie Le tampon a été doucement remonté vers le pharynx. les narines et le lobe de l’oreille du patient, en rotation, maintenus en place pendant environ secondes, retirés doucement et placés dans des flacons UTM FLOQS, Copan Flock Technologies; à partir de mai, un deuxième prélèvement a été recueilli auprès des nourrissons. Les aspirats nasopharyngés ont été obtenus en douchant le nasopharynx à l’aide d’une seringue -mL avec mL de solution saline stérile par un tube d’aspiration placé dans les narines à la face postérieure du nasopharynx Mucus était aspiré et recueilli dans un récipient stérile avec UTM collecte des expectorations induite a eu lieu dans une pièce séparée, bien ventilée Pour la collecte des expectorations induite stérilité a été maintenue; les nourrissons ont été gardés nuls par bouche pendant des heures avant la procédure et nébulisés avec un bronchodilatateur pour ouvrir et préparer les voies respiratoires. Un massage thoracique a été effectué pour provoquer la toux des expectorations, et cela a été recueilli par aspiration dans un récipient stérile. glace et les NPS recueillis à Regan-Lowe à température ambiante au laboratoire de l’unité de recherche sur les pathogènes respiratoires et méningés du CHBAH, où la culture bactérienne a été effectuée immédiatement et les tests de PCR ont été effectués en quelques heures

Test de PCR

Les acides nucléiques totaux ont été extraits de l’échantillon clinique en utilisant une plateforme NucliSENS easyMAG bioMérieux, Marcy l’Etoile, France et testés par PCR qualitative en temps réel pour la présence de la séquence d’insertion coqueluche multicopie IS en utilisant un protocole modifié à celui décrit par Tatti et al ; Si les valeurs Ct du seuil du cycle IS étaient ≤, les acides nucléiques totaux ont été ré-extraits et testés par PCR en temps réel pour IS et dans une réaction duplex pour hISet pIS avec une température d’hybridation de ° C, et dans une réaction unipolaire pour la sous-unité S ptxS avec une température de recuit de ° C Les amorces et sondes utilisées par LTC Tech South Africa sont listées dans le tableau supplémentaire Des contrôles internes ont été inclus pour vérifier l’intégrité des échantillons et l’efficacité de l’étape d’extraction et détecter la présence d’inhibiteurs PCR. Nous avons suivi l’algorithme -target développé par Tatti et al dans notre deuxième PCR pour déterminer la positivité de la PCR pour B pertussis Tableau supplémentaire Les échantillons avec un résultat PCR intermédiaire ont été jugés non-positifs dans la présente analyse

Culture

Des NPS dans des milieux Regan-Lowe et des échantillons d’expectorations induites ont été inoculés sur gélose enrichie en charbon avec mg / mL de céphalexine et% de gélose au sang de cheval, à leur arrivée au laboratoire. Les plaques d’agar ont été incubées à ° C dans de l’air ambiant très humide. Des réactions de catalase et d’oxydase ont été effectuées sur les colonies suspectées de Bordetella, et des tests de confirmation de la PCR ont été effectués sur les isolats positifs à la catalase et à l’oxydase. Les colonies ont été identifiées sur la base de la morphologie typique. plaques non présentes sur les plaques de gélose au sang correspondantes, coloration de Gram, et tests de catalase et d’oxydase. Les espèces suspectées d’être des Bordetella ont été soumises à des tests de PCR.

Analyses statistiques

La fréquence de détection de B pertussis par PCR a été comparée entre les NPS et les NPA et les spécimens d’expectorations induites par χ test L’accord entre les méthodes d’échantillonnage a été évalué par Cohen κ, et les valeurs ont été considérées comme très bonnes. sensibilité et valeur prédictive négative VAN de chaque méthode d’échantillonnage en considérant tout résultat positif de l’un des échantillons comme l’étalon-or de la présence de B pertussis Cette approche signifie que la spécificité et la valeur prédictive positive de l’un ou l’autre type d’échantillon sont%. , nous avons calculé la sensibilité et la VAN avec les intervalles de confiance% CI, et ceux-ci ont été comparés entre les spécimens par test exact Fisher D’autres variables continues ont été représentées comme moyenne ou médiane et comparées par test t de Student ou Mann-Whitney test StataCorp , College Station, Texas et GraphPad Prism version GraphPad, La Jolla, Californi Une signification statistique a été conclue si P & lt;

Considération éthique

L’étude a été approuvée par l’Université de Witwatersrand Human Research Ethics Committee numéro Les tuteurs légaux ou les parents des nourrissons ont fourni un consentement éclairé écrit pour la collecte des échantillons et l’examen des dossiers cliniques

RÉSULTATS

âge, bien que le statut d’exposition au VIH soit inconnu a pour un pourcentage plus élevé de nourrissons sans échantillon NPA% par rapport aux nourrissons avec un échantillon NPA% P =; Test de réaction en chaîne de la polymérase de Bordetella pertussis pendant la période d’étude Novembre à mai NPA et NPS caractéristiques testés par PCR n = non NPA et NPS testés par PCR n = P Valeur Age, d, à l’admission, IQR médian – – Homme exposition au VIH exposition au VIH non-exposée inconnue mars à octobre b crachats induits et NPS testés par PCR n = non crachats induits et NPS testés par PCR n = âge, d, à l’admission, médiane IQR – – sexe masculin c VIH exposé au VIH non exposé Exposition au VIH inconnue de novembre à mai Caractéristique NPA et NPS Testé par PCR n = Non NPA et NPS Testé par PCR n = P Valeur Age, d, à l’admission, médiane IQR – – Sexe masculin a VIH exposé VIH non exposé exposition au VIH inconnu Mars à Octobre b Expectorations induites et NPS testées par PCR n = Non Expectorations induites et NPS testées par PCR n = Âge, d, à l’admission, IQR médian – – Sexe masculin c Exposé au VIH Exposition au VIH non exposée au VIH Inconnu Les données sont présentées en% sauf indication contraire. Abréviations: VIH, virus de l’immunodéficience humaine; IQR, intervalle interquartile; NPA, aspiration nasopharyngée; SNP, nasopharyngée Sexe inconnu pour nourrisson Seuls les nourrissons âgés de un jour et admis dans les services médicaux sont inclusc Sexe inconnu chez les nourrissons Des cas de coqueluche confirmés par PCR ont été identifiés chez les nourrissons ayant subi un test NPS et NPA; % étaient positifs à la PCR sur les deux échantillons, tandis que chacun était positif uniquement sur NPS ou NPA κ =; Tableau Le patient positif uniquement sur NPA avait un résultat “intermédiaire” sur NPS avec Ct valeur pour IS de et ne montrant aucune amplification pour ptxS La valeur Ct moyenne pour IS était similaire entre NPS et NPA sur les nourrissons avec un résultat PCR-positif sur les deux échantillons vs, respectivement; P = Tableau Bordetella pertussis Polymérase Réaction de réaction en chaîne à l’aide de différents échantillons respiratoires Paramètre NPS NPA Echantillons d’expectoration induits testés, Non Coqueluche Cas PCR positifs%%% Pertussis Cas PCR-positifs dans NPS et NPAa / … Coqueluche PCR-positifs dans NPS et sputum induite / … / Sensibilité% CI%% -%%% -%%% -% Valeur prédictive négative% CI%% -%%% -%%% -% Paramètre NPS NPA Induit Expectorations testées, Non Pertussis PCR-positive cas%% Pertussis Cas PCR-positifs dans NPS et NPAa / / … Coqueluche Cas PCR-positifs dans NPS et sputum induit / … / Sensibilité% CI%% -%%% -%%% -% Valeur prédictive négative% CI% % -%%% -%%% -% Les données sont présentées comme non sauf indication contraire. Abréviations: IC, intervalle de confiance; NPA, aspiration nasopharyngée; NPS, écouvillon nasopharyngé; PCR, amplification en chaîne par polymérase Nombre de nourrissons avec PCR positive sur les deux échantillons PCR positive résultat exclusivement sur le type d’échantillon décrit sur la rangée supérieure / résultats de PCR positifs combinés des deux échantillonsDe mars à octobre, les enfants enrôlés étaient éligibles à l’expectoration induite Les nourrissons ont été testés avec des NPS appariés et des expectorations induites pour B pertussis Parmi les nourrissons éligibles à la collecte induite d’expectorations, aucune différence n’a été détectée entre ceux chez qui les expectorations ont été induites. Tableau 1 Dans l’ensemble, la coqueluche confirmée par PCR a été identifiée chez les nourrissons ayant reçu un NPS et une expectoration induite. Ce pourcentage incluait le% qui était positif pour les deux échantillons, le% seulement positif pour le NPS et le% crachats induits κ =; Tableau 1 Un patient qui était PCR positif uniquement sur expectoration induite avait un résultat “intermédiaire” sur NPS avec une valeur Ct pour IS de et ne montrant aucune amplification pour ptxS La valeur Ct moyenne pour IS était similaire entre NPS et expectorations induites sur les nourrissons qui étaient PCR positive sur les deux échantillons vs, respectivement; P = En outre, des cas étudiés dans lesquels un NPS et une expectoration induite ont été entrepris et parmi lesquels un NPA a également été entrepris n =, un cas supplémentaire de coqueluche a été identifié qui n’a été identifié ni par NPS ni expectorations induites les enfants étaient cliniquement stables, ce qui signifiait que la collecte des expectorations induites se produisait en moyenne jours jours écart [SD], jours après la collecte NPS Alors que NPS a été recueilli en moyenne jours SD, jours après l’admission, les expectorations induites ont été recueillies jours SD , jours après l’admission P & lt; Les taux de détection de la PCR étaient similaires en utilisant soit NPSs%, NPAs% ou crachats induits% L’inclusion de la positivité de l’un des sites d’échantillonnage a augmenté l’identification de B pertussis aux cas% En considérant ces nourrissons comme de vrais positifs de PCR de coqueluche, les types de spécimens testé par PCR avait un NPV similaire>%; la sensibilité était également similaire pour les NPS% par rapport aux NPA%; P = et à l’expectoration induite%; P = Table

Isolats de culture de Bordetella pertussis

La détection de B pertussis par culture a été tentée dans des échantillons d’expectorations induites, et% d’isolats ont été récupérés par rapport à%; P = cas de coqueluche confirmés par PCR chez les mêmes nourrissons La sensibilité de la culture sur les expectorations induites était de%% IC,% -% par rapport à la positivité de la PCR chez les nourrissons & lt; Au cours des mois, les NPS ont été recueillis dans des milieux de Regan-Lowe pour la culture bactérienne, dont% ont donné lieu à la croissance de B pertussis. De ce groupe de nourrissons, n = [%]; La sensibilité de la culture à l’aide de NPS dans Regan-Lowe était de% IC,% -% comparée à la PCR Comparaison du rendement de culture de B pertussis entre NPS et expectoration induite, des nourrissons qui avaient les deux échantillons soumis à la culture n =,% étaient positifs, desquels ont été identifiés sur les deux échantillons et chacun était positif uniquement sur les NPS ou les expectorations induites Tous les nourrissons qui étaient positifs à la culture pour la coqueluche étaient également coqueluche PCR positive Comparaison des valeurs Ct pour IS sur les échantillons soumis pour la PCR chez les nourrissons ayant eu des cultures, la valeur moyenne de Ct était plus faible chez les nourrissons positifs à la culture que chez les nourrissons qui étaient positifs à la PCR mais négatifs en culture, respectivement; P = Considérant la présentation clinique des nourrissons PCR-positifs pour la coqueluche qui ont subi des cultures, tous présentés avec de la toux, mais seulement la culture positive et la culture négative ont toussé pour & gt; jours, a eu une toux paroxystique avec la culture whoop positive et la culture négative, présenté avec culture de vomi post-test positif et culture négative, et un nourrisson culture négative présenté avec l’apnée

DISCUSSION

pour les tests B pertussis , l’utilité des expectorations induites pour la détection de la coqueluche a récemment été signalée en Afrique du Sud Dans notre étude, cependant, aucune valeur ajoutée significative des tests d’expectoration induite par rapport aux NPS n’a été notée; cette différence peut résulter des différents protocoles de PCR utilisés et du fait que les nourrissons recrutés dans notre étude étaient en général plus jeunes. Dans une étude cas-témoin d’enfants atteints de pneumonie, avec des cas ayant un âge médian de mois, la détection de B pertussis sur les NPS et les expectorations induites par PCR en utilisant un kit commercial FTDResp qui détecte la présence de l’IS Dans cette étude,% de tous les cas de coqueluche ont été détectés par des expectorations induites seulement; Dans un autre rapport d’Afrique du Sud, les enfants hospitalisés avec LRTI ont également été testés pour B pertussis sur NPS et induit des expectorations en utilisant un kit commercial double cible LightMix, comme décrit ci-dessous, l’utilisation d’une seule cible PCR. , et le test d’expectoration induite a augmenté le rendement de détection de B pertussis par rapport au NPS seul de% Les participants à l’étude étaient, cependant, & lt; ans, avec un âge médian de mois, et seulement% étaient & lt; Un autre fait qui pourrait contribuer à la différence observée dans les résultats des expectorations induites est que dans notre étude, les expectorations induites ont été recueillies seulement lorsque les nourrissons étaient cliniquement stables, quelques jours après la collecte de NPS, et tel que rapporté dans l’étude de Muloiwa et al , les participants positifs pour B pertussis sur expectoration induite avaient seulement une durée plus courte de symptômes comparés à ceux qui étaient B pertussis positifs sur NPS, suggérant que le test des expectorations induites est plus susceptible d’être positif très tôt au cours de l’infection, la culture de Bordetella pertussis a été considérée comme l’étalon-or en tant que pourcentage spécifique; cependant, sa sensibilité, comme nous l’avons également observé, est faible à modérée, allant de% à% [,,] Bien que nos chiffres soient faibles, les valeurs de Ct détectées dans les échantillons respiratoires testés par PCR étaient plus faibles dans les échantillons. Les isolats de pertussis ont été récupérés par culture comparativement aux échantillons où la culture a été tentée mais aucun B pertussis n’a été retrouvé, suggérant qu’une charge bactérienne plus élevée est requise pour l’isolement de culture. Dans notre étude, un cas de coqueluche était un résultat positif. Comparaison des symptômes classiques de la coqueluche, à savoir: toux prolongée, toux paroxystique, vomissements post-traumatiques chez les nourrissons ayant subi un test de dépistage de la coqueluche et culture positive et nourrissons atteints de coqueluche par PCR mais culture négative, aucune différence le nombre de nourrissons présentant des symptômes classiques de la coqueluche était faible en raison de la faible sensibilité de la culture, considérant cette méthode comme Dans notre analyse, nous avons utilisé une norme de référence composite pour comparer la sensibilité des différents échantillons, et des sensibilités comparables par test PCR ont été détectées pour les différents types d’échantillons respiratoires. En plus de l’échantillon clinique approprié, une PCR précise le test dépend également de la sélection de l’amorce, des conditions d’amplification et des contrôles positifs et négatifs internes et externes Dans notre étude, des échantillons ont été sélectionnés pour la présence de la cible IS, et si cette séquence d’insertion était détectée, La toxine pertussis a été étudiée Etant donné que la cible IS est présente en plusieurs copies dans le génome de B pertussis, cette PCR est très sensible ; cependant, comme l’EI est également présente dans les copies inférieures du génome de Bordetella holmesii et dans certains isolats de Bordetella bronchiseptica humains et animaux, une PCR IS isolée a des limites pour la détection de B pertussis PCR double cible, évaluation des valeurs Ct des deux cibles pour attribuer la positivité, et l’inclusion prudente des contrôles positifs et négatifs nous a permis d’identifier B pertussis avec une haute spécificité Limites de notre étude comprennent que tous les patients n’avaient pas les types d’échantillons testés par PCR, limitant les comparaisons avec les périodes de temps En outre, en raison de la procédure de culture laborieuse, la culture n’a été entreprise que chez moins de la moitié des participants. Nous avons restreint la collecte des expectorations induites aux nourrissons âgés de moins de. Étant donné que le fardeau le plus lourd de la coqueluche est chez les très jeunes enfants, et que les expectorations induites ne peuvent pas être recueillies, il existe probablement un rôle limité des expectorations induites dans le diagnostic de la coqueluche à cet âge. En conclusion, dans notre étude NPS, NPA, et l’expectoration induite effectué de manière similaire pour la détection de l’infection B pertussis chez les nourrissons par PCR, suggérant que pour améliorer les tests de coqueluche, le type d’échantillon collecté est probablement moins important que la standardisation du PCR qui peut éventuellement remplacer la culture bactérienne comme l’étalon-or

Données supplémentaires

Les documents supplémentaires sont disponibles à l’adresse http: // cidoxfordjournalsorg Composé de données fournies par l’auteur au profit du lecteur, les documents publiés ne sont pas copiés et relèvent de la seule responsabilité de l’auteur. Les questions ou commentaires doivent donc être adressés à l’auteur.

Remarques

Remerciements Les auteurs remercient tous les participants à l’étude; le personnel de l’Unité de recherche sur les pathogènes respiratoires et la méningite, y compris les équipes cliniques, de laboratoire et de données; et le département de pédiatrie de l’hôpital universitaire Chris Hani Baragwanath de Soweto en Afrique du Sud pour leur engagement envers leurs patients et leur soutien à nos activités de recherche. Les contributions du MCN ont conceptualisé l’étude, supervisé la composante laboratoire du projet et analysé les données. a écrit la première ébauche du manuscrit NS a effectué le développement du protocole, a dirigé la composante clinique du projet, et a participé à la première rédaction du manuscrit SD et NT a effectué l’analyse des échantillons et la révision des manuscrits a effectué la gestion clinique du projet et des participants manuscrit révision L d G révision de la culture bactérienne et des manuscrits SAM a conceptualisé l’étude, supervisé le projet et participé à la rédaction et à la révision des manuscritsDisclaimer Le contenu de ce rapport relève de la seule responsabilité des auteurs et ne représente pas nécessairement le vues officielles de leurs institutions Les donateurs n’ont participé à aucun aspect de l’étude, y compris la conduite des études, la collecte de données, l’analyse des données ou la rédaction du manuscrit. Soutien financier Ce travail a été soutenu par le projet de loi. Le numéro de subvention de la Fondation Melinda Gates OPP; l’Initiative des chaires de recherche sud-africaines du Département de la science et de la technologie et la Fondation nationale de recherche sur les maladies évitables par la vaccination; et l’Unité de recherche sur les agents pathogènes respiratoires et méningés du Conseil de recherches médicales. Parrainage de suppléments Cet article figure dans le supplément intitulé «Fardeau de la maladie causée par la coqueluche chez les nourrissons dans le contexte des stratégies d’immunisation de la mère». Fondation Melinda Gates Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: Aucun conflit rapporté Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués