Preuve de l’infection à Chlamydia trachomatis oculaire par l’ARN ribosomique après trois distributions annuelles d’azithromycine de masse dans les communautés atteintes de trachome hautement prévalent

Douze communautés trachomateuses-hyperendémiques ont été traitées avec 3 distributions annuelles massives d’azithromycine. Les enfants âgés de 0-9 ans ont été suivis 1 an après le troisième traitement. Un test basé sur l’ARN a détecté une infection chlamydienne oculaire chez plus d’enfants qu’un test ADN 69% vs 42 %, et dans un plus grand nombre de communautés 8 vs 7

L’Organisation mondiale de la santé L’OMS a ciblé le trachome en tant que problème de santé publique d’ici à 2020 Les distributions massives d’antibiotiques sont un élément important de la stratégie d’élimination du trachome de l’OMS Les directives actuelles recommandent des traitements annuels massifs à l’azithromycine Dans la plupart des études qui ont surveillé le trachome après 3 distributions massives d’azithromycine, seuls les signes cliniques du trachome ont été signalés. Cependant, les signes cliniques du trachome et de la chlamydiose oculaire sont mal connus. après les traitements antibiotiques de masse, probablement parce que les signes cliniques persistent pendant des mois après la suppression de la chlamydia oculaire [2] Les quelques études qui ont suivi la chlamydia oculaire après 3 distributions répétées d’antibiotiques en masse ont utilisé des tests d’amplification des acides nucléiques. Récemment, des études portant à la fois sur le trachome et la littérature sur les maladies sexuellement transmissibles ont démontré que les TAAN à ARN sont plus sensibles que ces tests ADN pour la détection de la chlamydia chez un individu [5-7] à base d’ARN. les tests ont une étape supplémentaire de capture de la cible et une cible génétique plus abondante, ce qui peut contribuer à augmenter la sensibilité. Il est possible que les communautés sans preuve ADN de chlamydia oculaire puissent avoir une infection détectable par un test basé sur l’ARN. ceci n’a pas été trouvé dans une étude antérieure [8] Dans ce rapport, nous utilisons des tests basés sur l’ARN et sur l’ADN pour surveiller 12 communautés trachomateuses hyperendémiques qui ont été traitées avec 3 distributions annuelles massives d’azithromycine.

Méthodes

Au cours d’un essai clinique randomisé en grappes mené en Éthiopie, 12 sous-districts aléatoires sélectionnés ont été traités avec 3 traitements de masse azithromycine annuels identificateur cliniquetrialsgov NCT00322972 [12] Nous avons effectué un recensement énumératif et la distribution massive d’azithromycine dans les 12 sous-groupes aux mois 0, 12 et 24 de l’étude A chaque distribution, les agents de santé auxiliaires ont offert une dose unique d’azithromycine directement observée 1 gramme pour les adultes, 20 mg / kg pour les enfants à toutes les personnes âgées de 1 an et plus. Nous avons effectué une surveillance dans une communauté sentinelle au hasard de chaque subkebele. des 12 communautés sentinelles, 50 enfants choisis au hasard âgés de 0-9 ans ont subi un examen conjonctival et une écouvillonnage au départ et au mois 36 soit 1 an après le troisième traitement de masse. Des échantillons aléatoires séparés d’enfants ont été sélectionnés à chaque point de recensement récent À chaque visite de suivi, 1 examinateur formé sur 13 a évalué la conjonctive tarsienne r inflammation trachomateuse folliculaire TF et inflammation trachomateuse intense TI selon le système simplifié de classification de l’OMS [9] L’examinateur a ensuite passé un tampon Dacron 3 fois sur la conjonctive tarsienne supérieure droite. Au 36ème mois, un tampon supplémentaire pour l’ARN chlamydia a été recueilli Mode d’utilisation des écouvillons et du milieu de transport du kit de prélèvement d’échantillons unisexe APTIMA-CT Les écouvillons d’ARN Gen-Probe ont toujours été prélevés après écouvillonnage Dacron Les examinateurs ont utilisé la même paire de gants pour les écouvillons Dacron et ARN pour chaque sujet d’étude. paire de gants pour chaque nouveau sujet Nous avons prélevé des écouvillons de contrôle négatif sur 5 enfants choisis au hasard par communauté pour chaque test en passant un écouvillon à moins d’un pouce de la conjonctive tarsale. Les échantillons d’écouvillons en dacron ont été stockés et transportés congelés, puis testés. ADN de C trachomatis à l’aide du test PCR AMPLICOR Les échantillons de tampons Dacron de Roche Diagnostics ont été analysés par lots de 2 écouvillonnages au hasard. Les échantillons d’écouvillonnage Dacron du mois 36 ont été analysés sous la forme de pools de 5 écouvillons, avec des tests individuels de tout pool d’ARN positifs. les écouvillons ont été stockés et transportés à San Francisco à température ambiante; des échantillons ont été traités en utilisant le test APTIMA-CT pour détecter l’ARN ribosomique de C trachomatis, également en pools de 5 avec des tests individuels de pools positifsNous avons comparé les prévalences communautaires entre la base et le mois 36, et entre les tests ADN et ARN, en utilisant un Wilcoxon apparié Nous avons estimé le regroupement des résultats au niveau communautaire et au niveau des ménages en calculant le coefficient de corrélation intraclasse ICC sur l’échelle logit, en utilisant la régression logistique des effets mixtes avec les ménages imbriqués dans la communauté comme un effet aléatoire [10] significativité des tests de ratio de vraisemblance comparant le modèle complet aux modèles imbriqués sans l’un des effets aléatoires Des modèles similaires ont été utilisés pour évaluer les associations avec le sexe et l’âge 5 ans contre 5 ans Toutes les analyses ont été effectuées avec le logiciel Stata, version 100

RÉSULTATS

Nous avons effectué des examens de référence sur 584 enfants âgés de 0 à 9 ans. La prévalence moyenne des preuves d’ADN de la chlamydia oculaire était de 419% intervalle de confiance à 95% [IC], 315-522; Tableau 1 La couverture antibiotique dans les trois distributions annuelles massives d’azithromycine était en moyenne de 809% ± 133%, 921% ± 50% et 873% ± 118% aux premier, deuxième et troisième traitements, respectivement

Tableau 1Prévalence du trachome cliniquement actif et de l’infection chlamydienne oculaire avant les traitements de masse Mois 0 et 1 an après 3 traitements annuels à l’azithromycine de masse Mois 36 Avant traitement Traitement après 3 traitements de masse% Non / Total SD moyen Non / Total TF / TIa ADNb% Coveragec TF / TIa DNAb RNAd 1 896 43/48 449 22/49 834 92 469 23/49 184 9/49 286 14/49 2 640 32/50 460 23/50 735 123 653 32/49 82 4/49 102 5 / 49 3 592 29/49 531 26/49 904 52 509 27/53 00 0/53 00 0/53 4 720 36/50 520 26/50 978 23 417 20/48 00 0/48 00 0/48 5 840 42/50 560 28/50 920 53 294 15/50 20 1/50 40 2/50 6 408 20/49 140 7/50 917 66 380 19/50 20 1/49 20 1/49 7 944 34/36 167 6/36 856 30 485 16/33 00 0/33 30 1/33 8 420 21/50 360 18/50 948 37 458 22/48 21 1/48 42 2/48 9 920 46/50 580 29/50 861 50 635 33/52 135 7/52 269 14/52 10 625 30/48 224 11/49 784 300 180 9/50 00 0/51 00 0/51 11 800 40/50 620 31/50 856 44 326 14/43 00 0/45 00 0/45 12 444 20/45 412 21/51 821 115 407 22/54 37 2/54 37 2/54 Moyenne IC à 95% 687 563-812 419 315-522 868 824-912 435 350-520 42 03-80 69 04-133 Avant traitement Traitement après 3 traitements de masse% Non / Total SD moyen Non / Total TF communautaire / ITa ADNb% Coveragec TF / TIa DNAb RNAd 1 896 43/48 449 22/49 834 92 469 23/49 184 9/49 286 14/49 2 640 32/50 460 23/50 735 123 653 32/49 82 4/49 102 5 / 49 3 592 29/49 531 26/49 904 52 509 27/53 00 0/53 00 0/53 4 720 36/50 520 26/50 978 23 417 20/48 00 0/48 00 0/48 5 840 42/50 560 28/50 920 53 294 15/50 20 1/50 40 2/50 6 408 20/49 140 7/50 917 66 380 19/50 20 1/49 20 1/49 7 944 34/36 167 6/36 856 30 485 16/33 00 0/33 30 1/33 8 420 21/50 360 18/50 948 37 458 22/48 21 1/48 42 2/48 9 920 46/50 580 29/50 861 50 635 33/52 135 7/52 269 14/52 10 625 30/48 224 11/49 784 300 180 9/50 00 0/51 00 0/51 11 800 40/50 620 31/50 856 44 326 14/43 00 0/45 00 0/45 12 444 20/45 412 21/51 821 115 407 22/54 37 2/54 37 2/54 Moyenne 95% CI 687 563-812 419 315-522 868 824-912 435 350-520 42 03-80 69 04-133 Abréviations: IC, intervalle de confiance; TF, inflammation trachomateuse folliculaire; TI, inflammation trachomateuse intenseTF et / ou TI, selon le système de classification simplifié de l’Organisation mondiale de la santé [9] bDNA évidence de chlamydia oculaire, testé avec la couverture antibiotique AMPLICOR-CTcMean lors des distributions massives d’azithromycine aux mois 0, 12 et 24d’ADN chlamydia, testé avec APTIMA-CTView Large suivi de suivi a été réalisée sur 583 enfants de 370 ménages au mois 36 1 an après la dernière distribution d’azithromycine; Tableau 1 Au total, 25 enfants de 20 ménages et de 7 communautés ont présenté des signes d’ADN de la prévalence moyenne de la chlamydia oculaire, 42% [IC 95%, 3% -80%]; P = 002 comparé au départ, et 41 enfants de 35 ménages et 8 communautés avaient une prévalence moyenne de l’ARN, 69% [IC 95%, 4% -133%] Pour les deux tests, la distribution de l’infection était fortement asymétrique, avec 80% d’enfants infectés vivant dans seulement 3 des 12 communautés Bien que les tests basés sur l’ADN et l’ARN aient été étroitement corrélés, Spearman ρ = 095, P & lt; 001, l’estimation de la prévalence de la chlamydia oculaire était plus élevée pour le test basé sur l’ARN comparé au test ADN. P = 02 La corrélation entre la prévalence communautaire de chlamydia oculaire et la prévalence de trachome cliniquement actif TF et / ou TI était similaire le test basé sur l’ARN ρ = 062, P = 03 ou le test basé sur l’ADN ρ = 064, P = 02 Tous les écouvillons positifs pour l’ADN étaient également positifs pour l’ARN Aucun écouvillon témoin négatif collecté au mois 36 testé positif pour l’ADN chlamydial n = 60 ou ARN n = 59 Nous avons trouvé des preuves de regroupement de l’ARN chlamydial dans les communautés ICC = 035 [IC 95%, 06-64]; test du rapport de vraisemblance P & lt; 001 et au sein des ménages de la même communauté ICC = 078 [55-100]; P = 001; nous avons observé des résultats similaires pour l’ADN chlamydial ICC = 038 [01-48]; P & lt; 0001 et ICC = 099 [97-100]; P & lt; 001, respectivement Trachome cliniquement actif a également été trouvé pour regrouper dans les deux communautés ICC = 006 [IC 95%, 01-12]; test du rapport de vraisemblance P & lt; 001 et les ménages ICC = 023 [IC 95%, 04-042]; P = 03 Nous n’avons trouvé aucune association entre la détection de l’ARN chlamydien et le sexe P = 35 ou l’âge P = 88, ni entre l’ADN chlamydien et le sexe P = 15 ou l’âge P = 21 Par contre, les enfants atteints de trachome cliniquement actif étaient plus susceptibles être un odds ratio masculin [OR], 156 [IC 95%, 105-231] et <5 ans OR, 282 [IC 95%, 179-446]

DISCUSSION

Après trois distributions annuelles massives d’azithromycine dans une région où le trachome est très répandu, les trois quarts des communautés avaient une prévalence d’ARN chlamydien de 5% Dans un tiers des communautés, nous étions incapables de détecter une seule infection chlamydienne oculaire. La présence répétée d’antibiotiques de masse pourrait permettre d’éliminer la chlamydia oculaire dans certaines communautés souffrant de trachome sévère, mais des poches de transmission élevée persisteront probablement, ce qui pourrait rendre l’élimination de la plus grande zone plus difficile Cette constatation est cohérente avec les rapports de persistance de faibles niveaux de chlamydia oculaire après ≥3 ans de distributions programmatiques massives d’antibiotiques, de promotion de l’hygiène et d’amélioration de l’assainissement du trachome [3, 4] Des 8 communautés présentant des infections chlamydiales, 6 a montré une prévalence plus élevée avec le test d’ARN par rapport au test d’ADN Une communauté a été classée s ayant éliminé l’infection par le test basé sur l’ADN mais pas par le test basé sur l’ARN Dans cette communauté discordante, le test basé sur l’ARN n’a détecté qu’un seul cas de chlamydia oculaire Ainsi, bien que le test basé sur l’ARN semble plus sévère Selon les directives de l’OMS, les communautés qui ont déjà reçu 3 séries d’azithromycine en masse devraient continuer à recevoir des traitements de masse jusqu’à ce que la prévalence de la TF soit <5% [ 1] Dans cette étude, toutes les communautés auraient pu bénéficier d'un traitement de masse continu, même si un tiers des communautés ne présentait aucune preuve de chlamydia oculaire. Les traitements de masse continus peuvent néanmoins être judicieux, car l'infection chlamydienne oculaire peut rapidement revenir après l'arrêt de la masse. distributions d'azithromycine dans les zones de trachome hyperendémique [11] Les programmes pourraient aussi souhaiter minimiser les inconvénients de la masse continue. Comme l'ont montré cette étude et d'autres études, les clusters de Chlamydia oculaire par ménage suggèrent que les stratégies pour cibler les foyers infectés pourraient être utiles pour l'élimination du trachome. En conclusion, Nous avons montré que 3 traitements annuels de masse azithromycine peuvent éliminer l'infection à Chlamydia dans certaines communautés, mais pas toutes les communautés avec une forte prévalence d'infection peuvent persister après 3 traitements de masse, ce qui peut entraver les efforts d'élimination. un test basé sur l'ADN a fait, bien que la signification clinique de ce n'est pas clair

Remarques

Remerciements

Nous remercions Donald Everett Institut national de l’œil [NEI], Bethesda, Maryland, qui était l’agent de programme pour l’essai clinique sous-jacent; le comité de sécurité et de surveillance des données pour l’essai clinique sous-jacent, y compris l’Université William Barlow de Washington, Seattle, Washington; Président, Donald Everett NEI, Bethesda, Maryland, Fondation internationale des yeux Larry Schwab, Kensington, Maryland, Université Arthur Reingold de Californie, Berkeley, et Serge Resnikoff OMS, Genève, Suisse; Tadege Alemayehu, chef du bureau de santé de Goncha Woreda; Asrat Genet Amnie, chef du Bureau régional de la santé d’Amhara; le Ministère éthiopien de la santé; et le personnel de l’étude qui a effectué la surveillance, y compris Mitselal Abrahale, Melkam Andualem, Rebecca Beauregard, Manahlosh Berihun, Michael Chen, Temesgen Demile, Tessema Eneyew, Banchu Gedamu, et Melese Temesgen

Aide financière

Ce travail a été soutenu par les National Institutes of Health NIH, subventions de l’Institut national de l’œil U10 EY016214 et K23EY019071; et le Centre national pour les ressources de la recherche, bureau du directeur numéro KL2 RR024130, qui finance l’Université de Californie, San Francisco Clinical and Translational Science Institute, la Fondation Bernard Osher, That Man May See, le Fonds Harper Inglis, la Fondation Bodri, le Fonds de recherche pour l’Asie du Sud, la recherche pour prévenir la cécité et l’Initiative internationale contre le trachome

Conflits d’intérêts potentiels

Tous les auteurs: Aucun conflit signalé Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués