Symptômes neurologiques chez les patients dont le liquide céphalorachidien est une réaction en chaîne de la culture et / ou de la polymérase positive à Mycoplasma pneumoniae

Nous décrivons des patients avec des signes neurologiques et des symptômes associés à l’infection à Mycoplasma pneumoniae M pneumoniae a été isolé à partir du liquide céphalorachidien CSF des patients: avec méningoencéphalite, avec méningite et avec infarctus cérébrovasculaire Un patient avait des maux de tête et des difficultés de concentration et de infection M pneumoniae a été détectée, par PCR, dans le liquide céphalo-rachidien de patients ayant des résultats de culture négatifs. Deux patients avaient des crises d’épilepsie, avaient une vision floue à la suite d’un œdème du disque optique et présentaient une neuropathie nerveuse périphérique.

Mycoplasma pneumoniae est une cause fréquente d’infections des voies respiratoires supérieures et inférieures; elle affecte également d’autres systèmes d’organes Une des manifestations extrapulmonary les plus communes est un désordre du système nerveux central et / ou périphérique Diverses présentations cliniques par exemple, la méningite, la méningoencéphalite, et la myélite transverse ont été décrites ailleurs Dans la majorité de ces cas, le diagnostic d’infection à M pneumoniae a été établi sur la base de tests sérologiques Nous décrivons des patients présentant divers symptômes et signes neurologiques dont les échantillons de LCR ont provoqué M pneumoniae par culture et / ou par acide nucléique M pneumoniae. PCR Deux cas sont présentés en détail

Patients et méthodes

Les patients ont été hospitalisés de juin à décembre au Centre Médical Universitaire Département des Maladies Infectieuses ou Département de Pédiatrie à Ljubljana, Slovénie Au début de la maladie, ils présentaient des symptômes respiratoires suivis de symptômes neurologiques et de signes. Pour la majorité des patients Dans notre étude, nous avons inclus des patients pour lesquels des tests sanguins et des tests sérologiques pour le LCP pour M pneumoniae ont été demandés et pour lesquels les tests sérologiques sanguins ont indiqué une infection aiguë Presque tous les patients ont été hospitalisés. tous les échantillons de sérum obtenus lors de l’admission à l’hôpital ont été testés positifs pour les anticorps IgM spécifiques au moyen d’EIA. Les aliquotes de CSF ont été congelées et utilisées dans la plupart des cas pour une culture d’analyse rétrospective et identification de M pneumoniae; PCRIsolation et identification L’isolement des mycoplasmes du LCR a été tenté en utilisant des plaques de gélose et des milieux de bouillon auxquels ont été ajoutés du sérum de cheval et d’autres composants favorisant la croissance de M pneumoniae. Les cultures ont été incubées à ° C pendant des semaines ou jusqu’à la croissance des mycoplasmes, l’analyse PCR de certains échantillons de LCR a donné des résultats positifs pour M pneumoniae mais, sur les milieux de culture, aucune croissance n’a pu être détectée. Des échantillons de CSF congelés ont été cultivés à nouveau et des milieux SP ont été utilisés pour augmenter les isolats. S’il n’y avait pas de croissance après quelques jours, des sous-cultures «aveugles» ont été faites sur des sous-cultures fraîches de SP qui n’ont pas donné de croissance après mois ont été considérées négatives pour M pneumoniae. Les colonies cultivées sur des plaques d’agar ont été identifiées comme M pneumoniae par immunofluorescence directe. / ou un dosage direct de l’immunoperoxydase DIP et par l’utilisation d’IgG de lapin marquée à la peroxydase de raifort pour la souche de type M pneumoniae FH et les procédures décrites ailleurs M La souche FH de type pneumoniae a été obtenue auprès de Janet M Bradbury University de Liverpool, Royaume-UniM pneumoniae isolée dans des bouillons de culture a été identifiée par: sous-culture et identification de colonies par DIF et DIP, et immunotransfert Western avec utilisation de peroxydase de raifort. anticorps monoclonal marqué mAb à la protéine -kDa P, qui porte un mAb d’épitope spécifique d’une espèce provenant d’un kit de détection d’antigène M pneumoniae; Virion-Serion En outre, mAb C / C à la protéine M pneumoniae -kDa GroE et mAb à P adhésine Chemicon ont été utilisés pour confirmer que les isolats contenant des aliquotes d’échantillon de M pneumoniaePCR CSF ont été centrifugés à, g pendant min, et l’ADN a été extrait de les pastilles Deux séries d’amorces oligonucléotidiques, MP-P / MP-P et MP- / MP-, ont été achetées auprès de MWG-Biotech Le premier ensemble d’amorces, MP-P / MP-P, a permis l’amplification d’une partie de l’adhésine P gène de M pneumoniae , et le second jeu d’amorces, MP- / MP-, servi pour l’amplification de la séquence spécifique de M pneumoniae La réaction de PCR standard contenait μL du lysat de l’échantillon, pmol de chaque amorce MP-P et MP-P, ou MP- et MP-, nM dNTP Pharmacia Biotech, mM de KCl, mM de Tris-HCl pH, mM de MgCl,% poids / volume de gélatine et U de Taq polymérase Life Technologies en μL de volume réactionnel Après la dénaturation pendant min à ° C, les cycles ont été effectués min à ° C, s à ° C et s à ° C. L’étape d’élongation finale a été prolongée pour min à ° C. Les produits de PCR ont été analysés par électrophorèse en gel d’agarose% et coloration au bromure d’éthidium. Les produits de PCR amplifiés par les amorces MP-P / MP-P ont été séquencés en utilisant le séquenceur automatisé d’ADN ABI PRISM Perkin Elmer et le kit de séquençage Rhodamine Terminator Cycle Perkin Elmer, selon les instructions du fabricant

Résultats

L’isolement de M pneumoniae du LCR a été tenté pour les patients, et les résultats des cultures ont été trouvés positifs pour les patients des échantillons de CSF, ont eu des résultats positifs dans la culture de bouillon; ils ont également produit une croissance de colonies de M pneumoniae après repiquage sur des plaques d’agar. L’ensemencement direct du CSF sur des plaques d’agar a donné des cultures dans lesquelles les colonies de M pneumoniae ont été identifiées par DIF et / ou DIP. Les résultats des tests de PCR étaient positifs pour tous les patients avec des résultats de culture positifs. Des patients supplémentaires avaient des résultats de PCR positifs seulement. Les séquences des gènes P révélaient au moins une identité de séquence% avec la séquence du gène P de référence. nucléotides – et avec la séquence correspondante de la souche FH Cependant, certaines variations de séquence distinctes, probablement caractéristiques des populations de M pneumoniae dans des échantillons de CSF de patients individuels, ont également été trouvées. Il y avait des patients féminins et masculins, pour la plupart des enfants ou des jeunes. adultes Pour des raisons cliniques, les patients ont été divisés en groupes Huit patients patients -, Les patients hospitalisés au Département des maladies infectieuses du Centre médical universitaire ont développé une infection aiguë du SNC peu de temps après l’apparition des symptômes respiratoires. La ponction lombaire a été réalisée par jour, – jours après le début de la maladie et au plus tard le troisième jour. après l’apparition des signes et symptômes neurologiques Le taux de sédimentation érythrocytaire était élevé chez les patients et le nombre de leucocytes était élevé chez les patients Les résultats de l’analyse de ponction lombaire sont présentés dans le tableau Deux patients atteints de méningite aiguë et ont eu une évolution simple sans séquelles Cinq patients ont souffert d’une méningo-encéphalite aiguë Deux garçons atteints de méningo-encéphalite et étaient somnolents; chez un patient, faiblesse des membres inférieurs et hypotonie, absence de réflexes et signe bilatéral de Babinski.

Tableau View largeTélécharger slideCaractéristiques et résultats pour les patients présentant des signes et des symptômes neurologiques d’infection à M pneumoniaeTable View largeTélécharger slideCaractéristiques et résultats pour les patients présentant des signes et symptômes neurologiques d’infection à M pneumoniae Chez les patients, le niveau de conscience s’est progressivement dégradé. coma profond Une ventilation mécanique était nécessaire Le traitement de tous les patients était pratiquement identique: chacun recevait de l’érythromycine iv, de l’acyclovir, une céphalosporine de troisième génération céfotaxime ou de la ceftriaxone, du mannitol et du furosémide. , c’était bien; son état a commencé à s’améliorer plusieurs jours après le début du traitement et il s’est complètement rétabli. Le deuxième patient a survécu avec un déficit mental résiduel. Le troisième patient est décédé des semaines après le début de la maladie. L’autopsie a révélé une encéphalomalacie, une pneumonie bilatérale et une splénomégalie. deuxième groupe de patients patients -; La table a commencé progressivement et a duré plus longtemps avant leur admission à l’hôpital. avant l’apparition des symptômes neurologiques L’isolement de M pneumoniae a été couronné de succès

Les rapports de cas

Elle a été traitée à la maison avec de l’amoxicilline / acide clavulanique. Au cours de la nuit précédant son hospitalisation, elle a soudainement remarqué une faiblesse dans son bras et sa jambe gauche, qui diminuait temporairement mais Quelques heures plus tard, à l’hôpital, elle était afébrile et souffrait de dysarthrie, avec parésie du septième nerf et hémiparésie gauche. L’examen thoracique a révélé une expiration prolongée et des râles diffus. Valeurs de laboratoire, leucocytes, globules rouges et numération plaquettaire; Tests de la fonction hépatique; et les taux d’azote uréique et de créatinine et de l’urée sanguine étaient dans les limites normales, à l’exception d’une légère élévation du taux de sédimentation érythrocytaire et du taux de protéine C-réactive respectivement en mm / h et mg / L. Les résultats de la radiographie thoracique étaient normaux La TDM crânienne initiale avec et sans contraste a révélé une lésion hypodense située dans la région parietotemporale droite et décrite comme un infarctus cérébrovasculaire Après la collecte d’échantillons de sang et de liquide céphalorachidien pour la culture bactériologique et les tests sérologiques, traitement aux antibiotiques Les résultats de l’électrocardiographie, de l’échocardiographie et de l’échographie abdominale étaient normaux. L’électroencéphalogramme montrait une anomalie latéralisée avec une activité delta haute tension dans l’hémisphère droit. Au cours des semaines suivantes, l’état neurologique du patient s’est amélioré. Elle était capable de o parler et marcher beaucoup mieux Les cultures bactériennes du liquide LCR sont restées stériles, à l’exception de M pneumoniae; Les résultats des tests sérologiques pour divers microorganismes, par exemple, virus de l’herpès simplex, Borrelia burgdorferi, arbovirus B et espèces de Chlamydia étaient négatifs La valeur IgM antimycoplasmique était positive, et la valeur IgG était limite dans le premier échantillon de sérum Tests pour une éventuelle maladie auto-immune y compris antinucléaire, antigène nucléaire extractible, antineutrophique, cytoplasmique et anticardiolipine, ainsi que les tests anticoagulants lupiques ont tous donné des résultats négatifs Le deuxième scanner crânien a montré un rétrécissement de la lésion L’angiographie cérébrale a montré une occlusion de la seconde artère insulaire Six mois plus tard , le déficit neurologique était minimeCase A -une fille âgée avait mal à la gorge et était traitée avec de l’azithromycine pendant des jours Depuis lors, elle éprouvait des maux de tête quotidiens De temps en temps, juste avant l’apparition des maux de tête, elle se plaignait de vision floue, et le mal de tête était accompagné de vertiges Elle ne pouvait pas se concentrer très bien et avait des difficultés Un mois plus tard, quand elle a été admise à l’hôpital pour subir des examens diagnostiques, son état neurologique était complètement normal. Résultats des analyses de routine du sang et de l’urine et analyse du LCR normaux Aucune anomalie n’a été détectée sur le scanner et l’IRM scintigraphie ou examen ophtalmologique L’électroencéphalographie montre une activité de fond irrégulière avec des ondes lentes dans les régions postérieures. Une asymétrie légère est présente. Les composantes lentes sont centrées et postérieures sur le côté droit et les ondes aiguës sont proéminentes sur le côté gauche La photostimulation intermittente provoque des éclats généralisés L’électroencéphalographie effectuée un mois plus tard a révélé moins de décharges épileptiformes, mais l’activité de fond était légèrement plus irrégulière. La photostimulation intermittente a provoqué une diffraction de la tête, des paupières et des mains. se décharge d’ondes aiguës et lentes, qui ne sont plus exprimées cliniquement. Elle n’apparaît pas pour un examen de suivi.

Discussion

Dans une étude,% des patients présentant une infection mycoplasmique ont développé des symptômes et des signes de troubles périphériques et / ou du système nerveux central L’évolution de la maladie était sévère dans certains cas, en particulier chez les patients. Avec méningoencéphalite Selon l’étude qui impliquait la plus grande série de patients publiés, des complications neurologiques apparaissent chez% des patients atteints d’infection à M pneumoniae. Chez les enfants, la manifestation la plus fréquente était la méningo-encéphalite. Le taux de patients neurologiques était de% Dans la majorité des cas publiés, le diagnostic repose sur des tests sérologiques disponibles dans le commerce, tels que CF, ELISA ou agglutinines froides. Cas confirmés par l’isolement de M pneumoniae du LCR ou par détection par PCR ne sont pas courants Dans notre étude, la tentative de culture M pneumoniae du LCR et de procéder à la PCR a été faite uniquement pour les patients chez lesquels les symptômes respiratoires étaient associés à des symptômes neurologiques et chez lesquels des anticorps sériques IgM et / ou IgG M pneumoniae étaient présents pendant la période de sélectionnés de cette manière avaient des résultats de culture positifs et avaient des résultats positifs d’analyse PCR L’identité des fragments de PCR amplifiés avec des amorces MP-P / MP-P a été confirmée par séquençage d’ADN Les présentations cliniques ne différaient pas de celles déjà décrites. pour les patients ayant des antécédents récents d’infection, seuls les acides nucléiques mycoplasmiques ont été détectés si un délai plus long s’est écoulé entre le début de la maladie et la ponction lombaire. Quatre patients atteints de méningo-encéphalite ont été traités à l’érythromycine. traitement par érythromycine semaine après l’apparition d’une maladie fébrile avec symptômes respiratoires et le jour a Trois patients ont reçu un macrolide par voie orale avant le début des complications neurologiques Les macrolides et les tétracyclines sont considérées comme efficaces pour les infections des voies respiratoires causées par M pneumoniae, mais leur rôle dans le traitement des complications neurologiques est moins clair. le CSF des patients atteints de méningite, même après de fortes doses parentérales Dans le LCR, la tétracycline atteint% -% du taux sérique Le mécanisme des dommages causés par M pneumoniae reste flou L’isolement de M pneumoniae du CSF confirme sans aucun doute envahissement du SNC ou, au moins, du CSF Deux autres mycoplasmes, M neurolyticum et M gallisepticum, produisent une neurotoxine, mais aucune production de toxines dans M pneumoniae n’a été signalée Des complexes immuns circulants ont été détectés dans les échantillons de sérum de certains patients, donc un processus auto-immunitaire est soupçonné d’être induite par une infection à M pneumoniae Dans ce cas, les immunosuppresseurs La thérapie ve peut s’avérer plus bénéfique que la thérapie avec des antibiotiques, en particulier parce que les macrolides et la tétracycline n’atteignent que de faibles concentrations dans le LCR